Serielle Verdünnung — Rechner
Entwerfen Sie eine serielle Verdünnungsreihe für Mikroplatten- oder Röhrchen-Workflows. Geben Sie die Ausgangskonzentration, die Anzahl der Schritte, den Verdünnungsfaktor (oder die kumulierte Endverdünnung) und das Arbeitsvolumen pro Röhrchen oder Well ein. Der Rechner liefert das Transfervolumen für jeden Schritt, die laufende Konzentration und die kumulierte Verdünnung.
Rechner
Werte eingeben und berechnen, um den Röhrchen-für-Röhrchen-Plan zu sehen
Finale Röhrchenkonzentration
Laborhinweis
Tube-by-tube plan
| Röhrchen | Solvent | Transfer | Verdünnung | Concentration |
|---|
Vsolvent = Vtransfer ÷ (F − 1) · Cn = Cstock ÷ Fn
Eine 1:F-Verdünnung mischt einen Teil Probe mit (F − 1) Teilen Lösungsmittel, daher wird jedes Röhrchen mit Transfervolumen ÷ (F − 1) Lösungsmittel vorbefüllt. Nach dem Mischen wird dasselbe Volumen in das nächste Röhrchen überführt, wodurch die Verdünnung bei jedem Schritt mit F multipliziert wird. Die Konzentration von Röhrchen n ist die Stammlösung geteilt durch F hoch n.
Zu dieser Berechnung
Worum es geht
Eine serielle Verdünnung ist eine schrittweise Verdünnung, bei der jedes Röhrchen aus dem vorherigen um einen festen Faktor (üblicherweise 1:2, 1:5 oder 1:10) verdünnt wird. Nach n Schritten ist die kumulierte Verdünnung der pro-Schritt-Faktor hoch n.
Warum man es verwendet
Mehrere Größenordnungen auf einer einzigen Platte abzudecken ist nur praktikabel, wenn jedes Well ein Bruchteil des vorherigen ist. Serielle Verdünnungen sind das Rückgrat von Standardkurven, MHK-Tests und Titerbestimmungen.
Warum es diesen Rechner gibt
Ein transferierbares und genaues Transfervolumen über eine mehrstufige Reihe hinweg zu wählen ist eine kleine arithmetische Schleife, aber die kumulierte Faltenverdünnung wird leicht falsch angegeben. Der Rechner liefert jeden Schritt in einer einzigen Tabelle, sodass Sie die gesamte Reihe vor Beginn sehen.
Wichtige Annahmen
- Die Mischung ist in jedem Schritt perfekt (jeder Transfer equilibriert vollständig vor der nächsten Entnahme).
- Das Arbeitsvolumen pro Schritt reicht aus, um das Transfervolumen mit der verfügbaren Pipette zu entnehmen.
- Keine Verdunstung oder Volumenverlust zwischen den Schritten.
Einschränkungen
- Es modelliert keinen kumulierten Volumenfehler; bei langen Reihen eine unabhängige Überprüfung des Endröhrchens in Betracht ziehen.
- Es korrigiert nicht für viskose oder nichtideale Proben.
- Es nimmt in jedem Schritt denselben Verdünnungsfaktor an — heterogene Reihen erfordern eine manuelle Tabelle.
Was berechnet wird
- Per-tube plan
- For each tube: solvent volume, transfer volume, concentration, and dilution vs. stock.
- Final concentration
- Concentration in the last tube, in the stock unit.
- Total dilution
- Dilution factor of the final tube relative to the stock.
- Total solvent volume
- Combined solvent to pre-fill all tubes.
Häufig gestellte Fragen
Wie plant man eine Verdünnungsreihe mit diesem Rechner?
Geben Sie die Stammkonzentration mit Einheit, den Verdünnungsfaktor jedes Schritts (×F), das Transfervolumen (in mL oder µL) und die Anzahl der Röhrchen (1 bis 12) ein. Der Rechner liefert eine Tabelle pro Röhrchen — wie viel Lösungsmittel vorzufüllen ist, welches Volumen zu übertragen ist und welche Konzentration nach jedem Schritt herrscht — dazu Endkonzentration, Gesamtverdünnung und das insgesamt vorzubereitende Lösungsmittelvolumen.
Wie werden die Röhrchenvolumina und Schritt-Konzentrationen berechnet?
Jedes Röhrchen folgt der 1:F-Konvention: 1 Teil Probe plus (F − 1) Teile Lösungsmittel, die Vorfüllung mit Lösungsmittel ist also Transfervolumen geteilt durch (F − 1). Die Konzentration nach Schritt i ist die Stammkonzentration geteilt durch F hoch i, und nach n Röhrchen beträgt die Gesamtverdünnung F hoch n. Bei einer 10er-Verdünnungsreihe mit 6 Röhrchen und 1 mL Transfer kommen vor dem ersten Transfer 1/9 mL Lösungsmittel in jedes Röhrchen, und das letzte Röhrchen ist 10^6-fach verdünnt.
Was bedeutet der Verdünnungsfaktor pro Schritt, und warum muss er größer als 1 sein?
Der Verdünnungsfaktor pro Schritt sagt, wie viel verdünnter jedes Röhrchen gegenüber dem vorherigen ist: 2 bei einer 2er-Reihe, 10 bei einer 10er-Reihe. Ein Faktor von 1 oder darunter beschreibt gar keine Verdünnung, deshalb lehnt der Rechner ihn mit einer Fehlermeldung ab. Verwenden Sie für alle Röhrchen denselben Faktor — der Rechner trägt einen einheitlichen Verdünnungsfaktor über die ganze Reihe.
Welche Konzentrationseinheiten kann ich für eine Verdünnungsreihe verwenden?
Der Rechner akzeptiert M, mM, µM, mg/mL, µg/mL, Zellen/mL und KbE/mL, und alle Konzentrationen in den Ergebnissen bleiben in der Eingabeeinheit. Damit funktioniert er direkt mit einer Stammlösung in µM oder einer Kultur, die als KbE/mL ausgezählt wird. Er bildet nur die Verdünnungsarithmetik ab — Umrechnen und Platten auszählen erledigen separate Werkzeuge.
Worauf muss ich bei einer Verdünnungsreihe für die Keimzahlbestimmung achten?
Der Rechner warnt, wenn das Transfervolumen unter die praktische Pipettiergrenze von 2 µL fällt, weil sich kleine Fehler über die Reihe fortpflanzen und das letzte Röhrchen am ungenauesten wird. Er markiert außerdem, wenn Faktor und Röhrchenzahl die Gesamtverdünnung über das präzise Berechenbare hinaus schieben — dann reduzieren Sie den Faktor oder die Anzahl der Schritte. Beachten Sie: Er plant nur Volumina; welche Verdünnungen später in Ihren auszählbaren KbE-Bereich fallen, entscheiden Sie selbst.
Nur für Forschung und Lehre. Nicht für klinische oder diagnostische Entscheidungen. Prüfen Sie Berechnungen vor kritischen Anwendungen immer eigenständig nach.