Calculadora de Diluição Seriada
Projete uma série de diluições seriadas para microplacas ou tubos. Informe a concentração inicial, o número de etapas, o fator de diluição (ou a diluição final acumulada) e o volume de trabalho por tubo ou poço. A calculadora retorna o volume de transferência em cada etapa, a concentração corrente e a diluição acumulada.
Calculadora
Digite os valores e calcule para ver o plano tubo a tubo
Concentração final do tubo
Nota de bancada
Tube-by-tube plan
| Tubo | Solvent | Transfer | Diluição | Concentration |
|---|
Vsolvent = Vtransfer ÷ (F − 1) · Cn = Cstock ÷ Fn
Uma diluição 1:F mistura uma parte de amostra com (F − 1) partes de solvente, portanto cada tubo é pré-carregado com volume de transferência ÷ (F − 1) de solvente. Após a mistura, o mesmo volume passa ao tubo seguinte, multiplicando a diluição por F a cada etapa. A concentração do tubo n é a solução estoque dividida por F elevado a n.
Sobre este cálculo
O que é
Uma diluição seriada é uma diluição em etapas em que cada tubo é diluído a partir do anterior por um fator fixo (comumente 1:2, 1:5 ou 1:10). Após n etapas, a diluição acumulada é o fator por etapa elevado a n.
Por que é usado
Cobrir várias ordens de grandeza em uma única placa só é prático quando cada poço é uma fração do anterior. As diluições seriadas são a base de curvas padrão, ensaios de CIM e determinações de título.
Por que esta calculadora existe
Escolher um volume de transferência pipetável e preciso ao longo de uma série multi-etapa é um pequeno laço aritmético, mas a diluição acumulada é fácil de enunciar errado. A calculadora retorna cada etapa em uma única tabela para você ver a série completa antes de começar.
Premissas principais
- A mistura é perfeita em cada etapa (cada transferência se equilibra totalmente antes da próxima retirada).
- O volume de trabalho por etapa é suficiente para retirar o volume de transferência com a pipeta disponível.
- Não há evaporação nem perda de volume entre as etapas.
Limitações
- Não modela o erro volumétrico acumulado; para séries longas, considere uma verificação independente do tubo final.
- Não corrige para amostras viscosas ou não ideais.
- Assume o mesmo fator de diluição em todas as etapas — séries heterogêneas exigem uma tabela manual.
O que é calculado
- Per-tube plan
- For each tube: solvent volume, transfer volume, concentration, and dilution vs. stock.
- Final concentration
- Concentration in the last tube, in the stock unit.
- Total dilution
- Dilution factor of the final tube relative to the stock.
- Total solvent volume
- Combined solvent to pre-fill all tubes.
Perguntas frequentes
Como fazer diluições seriadas com esta calculadora?
Informe a concentração do estoque e sua unidade, o fator de diluição de cada etapa (diluição ×F), o volume de transferência (em mL ou µL) e o número de tubos (1 a 12). A calculadora devolve uma tabela por tubo — quanto solvente pré-carregar em cada tubo, o volume a transferir e a concentração após cada etapa — além da concentração final, da diluição total e do volume total de solvente a preparar.
Como são calculados os volumes dos tubos e as concentrações de cada etapa?
Cada tubo segue a convenção 1:F: 1 parte de amostra mais (F − 1) partes de solvente, então a pré-carga de solvente é o volume de transferência dividido por (F − 1). A concentração após a etapa i é a do estoque dividida por F elevado a i, e após n tubos a diluição total é F elevado a n. Numa diluição seriada 1:10 de 6 tubos com transferência de 1 mL, cada tubo recebe 1/9 mL de solvente antes da primeira transferência e o último tubo fica diluído 10^6 vezes.
O que significa o fator de diluição por etapa, e por que ele deve ser maior que 1?
O fator de diluição por etapa indica quantas vezes mais diluído está cada tubo em relação ao anterior: 2 para uma série 1:2, 10 para uma série 1:10. Um fator 1 ou menor não descreve diluição alguma, então a calculadora o rejeita com erro. Mantenha o mesmo fator em todos os tubos — a ferramenta aplica um único fator de diluição à série inteira.
Quais unidades de concentração posso usar numa diluição seriada?
A calculadora aceita M, mM, µM, mg/mL, µg/mL, células/mL e UFC/mL, e todas as concentrações do resultado permanecem na unidade que você digitou. Dá para usar direto a partir de um estoque em µM ou de uma cultura contada em UFC/mL. Ela só faz a aritmética da diluição — para converter unidades ou contar colônias, use outra ferramenta.
No que prestar atenção ao planejar diluições seriadas para contagem em placa?
A calculadora avisa quando o volume de transferência cai abaixo do piso prático de pipetagem de 2 µL, porque pequenos erros se acumulam ao longo da série e o último tubo fica o menos preciso. Ela também sinaliza quando o fator e o número de tubos levam a diluição total além do que dá para calcular com precisão — reduza o fator ou o número de etapas. Note que ela só planeja volumes: escolher quais diluições vão cair na sua faixa contável de UFC/mL ainda é decisão sua.
Apenas para uso em pesquisa e ensino. Não destinado a decisões clínicas ou de diagnóstico. Sempre verifique os cálculos de forma independente antes de usos críticos.