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단백질 농도 계산기

단백질 농도를 추정하는 두 가지 방법. (1) Beer–Lambert: 단백질의 몰 흡광 계수와 분자량을 입력해 A280을 mg/mL로 변환. (2) 표준 가정 1 A280 = 1 mg/mL을 사용하여 혼합 단백질 시료에 적용. 계산기는 A260/A280 순도 메모도 제공합니다.

단백질 v1.0.0

계산기

입력값

블랭크 보정된 280 nm 흡광도(광로 1 cm).

사용 가능한 단백질 계수를 선택하세요.

광로 1 cm에서 1 mg/mL 용액의 흡광도.

측정 전 적용된 총 희석(1 = 무희석).

측정값을 입력하고 계산하여 농도를 확인하세요

이 계산에 대해

무엇을 하는 계산인가

Proteins absorb at 280 nm because of aromatic residues (tryptophan, tyrosine, and to a lesser extent cystine). For a purified protein with a known molar extinction coefficient, Beer–Lambert gives an accurate concentration; for a mixed or unknown sample, the heuristic 1 A280 = 1 mg/mL is a usable estimate.

왜 사용하는가

Almost every downstream application — gel loading, dilution to a working stock, assay setup — needs a protein concentration. A280 is the fastest available measurement, but the assumption you make (1 mg/mL per A280 vs. Beer–Lambert) drives the accuracy of every result downstream.

이 계산기가 필요한 이유

A280 readings are often reported in instrument software, but converting them into a usable mg/mL number is where mistakes happen — particularly the missing division by path length or the wrong extinction coefficient. The calculator does the unit bookkeeping and shows both the 1-A280 and Beer–Lambert results side by side.

주요 전제

  • The spectrophotometer was blanked with the same buffer the sample was diluted into.
  • For the 1-A280 path, the protein mixture is roughly "average" (e.g. a crude lysate); for purified proteins use the calculated path.
  • Path length is 1 cm, or the instrument has been corrected for a different path length.

한계

  • The 1 A280 = 1 mg/mL assumption fails badly for samples rich in nucleic acids (use A260/A280 subtraction).
  • It cannot detect proteins that lack aromatic residues or are present at sub-A280 noise-floor concentrations.
  • It does not distinguish folded from denatured protein — the extinction coefficient assumes the folded environment.

계산 결과 항목

농도 mg/mL
Protein concentration in the original (undiluted) sample.
몰 농도 µM
Molar concentration — shown in ε + molecular-weight mode.

자주 묻는 질문

  • A280 측정값으로 단백질 농도를 어떻게 계산하나요?

    이 계산기는 블랭크 보정된 A280에 Beer–Lambert 법칙을 적용합니다. 흡광도를 소광계수로 나누고 희석 배수를 곱하세요. 질량 계수 E(1 mg/mL)를 입력하면 mg/mL를 바로 얻고, 몰 소광계수 ε와 분자량을 함께 입력하면 mg/mL와 µM을 모두 얻을 수 있습니다. 원액을 그대로 측정했다면 희석 배수에 1을 입력하세요.

  • E(1 mg/mL)과 몰 소광계수 중 무엇을 써야 하나요?

    실제로 가지고 있는 계수를 사용하세요. E(1 mg/mL)은 광로장 1 cm에서 1 mg/mL 용액의 흡광도이므로, 그것만으로 농도를 mg/mL로 줍니다(예를 들어 BSA는 약 1.4). 몰 계수 ε(M⁻¹·cm⁻¹)은 분자량(g/mol)도 필요하며, 농도를 µM로도 보고하는 쪽은 이 모드입니다.

  • A280 값은 단백질 시료의 무엇을 실제로 재는 건가요?

    단백질은 280 nm의 자외선을 주로 트립토판·티로신·시스틴 잔기로 흡광하므로, 흡광도는 광로 속 단백질 양에 비례합니다. 이 관계는 그 단백질에 고유한 계수를 제공해야 비로소 고정되며, 그래서 이 계산기는 E(1 mg/mL) 또는 ε를 요구합니다. 장점은 몇 µL만으로도 측정되고 시료를 후속 작업에 그대로 쓸 수 있다는 점입니다.

  • 결과에 mg/mL와 µM이 모두 나오는 이유는 무엇이고, 언제 각각 쓰나요?

    몰 모드에서 작업할 때 둘 다 표시됩니다. 분자량이 있어 계산기가 질량과 물질량 사이를 서로 환산할 수 있기 때문입니다. mg/mL는 스톡을 작업 농도로 희석하거나 젤에 로딩할 때의 실무 단위이고, µM은 결합·효소 분석처럼 몰 비가 실험을 좌우할 때 중요합니다. E(1 mg/mL) 모드에서는 분자량을 입력하지 않았으므로 mg/mL만 보고됩니다.

  • A280 단백질 농도를 그릇되게 만드는 요소는 무엇인가요?

    핵산 오염은 A280을 부풀려 계산 농도를 높게 만들므로, 시료의 A260/A280 비율을 확인하고 필요하면 보정하세요. 고농도 DTT, 이미다졸, Triton처럼 280 nm 부근에서 흡광하는 버퍼 성분도 측정값을 왜곡하므로 같은 버퍼로 블랭크를 잡으세요. 이 계산기는 광로장 1 cm와 대상 단백질 및 그 환원 상태에 맞는 계수를 전제하며, 자체적인 오염 보정은 하지 않습니다.

연구 및 교육 용도로만 사용하십시오. 임상 진단이나 의료 결정에 사용할 수 없습니다. 중요한 작업에 사용하기 전에 항상 계산 결과를 독립적으로 확인하십시오.